Versuch: Wöhlersche Harnstoffsynthese und Harnstoffnachweise
Beim Experimentieren den Allgemeinen Warnhinweis unbedingt beachten.
Versuch 1: Harnstoffsynthese nach Wöhler
Schülerversuch; 5 min.
Geräte
Bunsenbrenner, Dreifuß, Keramikdrahtnetz, Porzellanschale (Durchmesser etwa 10
cm), Becherglas (50 ml), Reagenzgläser, Waage.
Chemikalien
Kaliumcyanat (Xn), Ammoniumchlorid (Xi), destilliertes Wasser.
Durchführung (Schutzbrille)
Hinweis: Bei dem folgenden Versuch darfst du die Mischung nicht völlig zur
Trockne eindampfen, da sich sonst anstelle von Harnstoff ausschließlich Biuret
bildet!
Löse in dem kleinen Becherglas 1,5 g Kaliumcyanat und 1 g Ammoniumchlorid in
10 ml destilliertem Wasser. Die Lösung gibst du in das Porzellanschälchen und
dampfst sie langsam ein. Achtung, zum Schluss (kurz vor der Trockne) fängt die Mischung an zu
spritzen, deshalb Schutzbrille tragen. Wenn die Mischung anfängt zu spritzen,
stellst du den Brenner zur Seite und rührst den Kristallbrei noch etwas um. Die Masse darf
nicht völlig trocken werden! Lasse danach abkühlen.
Versuch 2: Vereinfachte Biuretprobe
Schülerversuch; 5 min.
Geräte
Reagenzgläser, Tropfpipetten.
Chemikalien
Wöhlersche Produktmischung aus Versuch 1, Natronlauge (w = 10 %) (C),
Kupfersulfatlösung (c = 0,5 mol/l) (Xn).
Durchführung
Gib einen Spatel voll von der Reaktionsmischung aus der Wöhlerschen
Harnstoffsynthese in ein Reagenzglas und löse die Masse in etwa 5 ml destilliertem
Wasser. Dann gibst du 1 ml Natronlauge zu und vermischst gut. Tropfe nun etwas
Kupfersulfatlösung zu und vermische jedesmal gut. Eine violette Färbung weist auf
das Vorliegen von Biuret hin.
Hast du zuviel Kupfersulfatlösung zugegeben, bildet sich Kupferhydroxid. Lasse dann
etwas stehen, damit der Niederschlag sedimentiert. Die klare Lösung zeigt die
typische purpurne Farbe des Biuret-Kupfer-Komplexes.
Versuch 3: Substratspezifität der Urease
(-> Versuch.)
Versuch 4: Enzymatischer Nachweis von Harnstoff in der Wöhlerschen Produktmischung
Schülerversuch; 5 min.
Geräte
Reagenzgläser, Tropfpipetten, Spatel.
Chemikalien
Wöhlersche Produktmischung aus Versuch 1, alkoholische Phenolphthaleinlösung
(w = 1 %) (F), Urease, Harnstofflösung (w = 1 %), Indikatorpapier.
Durchführung
Wichtig: Vor dem Versuch musst du dich mit einer 2%igen Harnstofflösung davon
überzeugen, ob die Urease überhaupt "funktioniert".
In ein Reagenzglas füllst du etwa 5 ml Lösung aus Versuch 1. Dazu gibst du 1 bis 2
Tropfen Phenolphthaleinlösung. Neutralisiere die Lösung gegebenenfalls mit etwas
Salzsäure (Indikatorpapier verwenden!).
Schlämme in einem Reagenzglas eine Spatelspitze Ureasepulver in destilliertem
Wasser auf.
Gieße dann die neutralisierte Reaktionslösung in das Reagenzglas mit
Ureaseaufschlämmung, vermische gut und lasse den Ansatz stehen.
Ergebnis
Nach kurzer Zeit beginnt die Lösung sich zu röten.