Versuch: Dünnschichtchromatographie von Aminosäuren
Schülerversuch; 30 min.
Beim Experimentieren den Allgemeinen Warnhinweis unbedingt beachten.
Geräte
Chromatographiekammer oder Marmeladenglas mit Deckel, Siedekapillaren,
Bleistift, Haartrockner, Zerstäuber (einfache Sprühflasche reicht aus).
Chemikalien
Dünnschicht-Chromatographie (DC)-Folie (ca. 5 cm x 10 cm), Fließmittelgemisch
(n-Butanol (Xn), Eisessig (C), Wasser im Volumenverhältnis 4:1:1),
Aminosäurelösungen (w = 0,1 %), z. B. wässrige Valin-, Glycin- und
Alanin-Lösungen), Analysegemisch (bestehend aus z. B. Glycin und Valin),
Ninhydrin-Lösung (T).
Durchführung
Das Marmeladenglas wird mit dem Fließmittelgemisch gefüllt, so dass die
Flüssigkeit etwa 5 mm hoch im Glas steht. Das Marmeladenglas wird verschlossen,
um Kammersättigung zu erreichen. In der Zwischenzeit wird mit einem dünnen
Bleistift 1 cm vom unteren Rand der DC-Folie eine Startlinie gezogen. Darauf
trägt man zum einen das Analysegemisch und zum anderen die Vergleichsproben mit
Hilfe einer Kapillare in gleichmäßigen Abständen auf.
Nun stellt man die DC-Folie in das Marmeladenglas mit dem Fließmittelgemisch.
Kurz bevor das Fließmittel den oberen Rand der Folie erreicht, wird sie
herausgenommen, die Laufstrecke markiert und die Folie mit dem Haartrockner getrocknet.
Die getrocknete DC-Folie wird nun im Abzug mit
Ninhydrin-Lösung besprüht (nicht zu stark!) und nochmals ca. 3 min gefönt.